روش جدید خالص سازی و سرولوژی جدایه های پوتی ویروس از قیاق و نیشكر در ایران

توضیحات

 روش جدید خالص سازی و سرولوژی جدایه های پوتی ویروس از قیاق و نیشكر در ایران دارای 4 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد روش جدید خالص سازی و سرولوژی جدایه های پوتی ویروس از قیاق و نیشكر در ایران  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی روش جدید خالص سازی و سرولوژی جدایه های پوتی ویروس از قیاق و نیشكر در ایران،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن روش جدید خالص سازی و سرولوژی جدایه های پوتی ویروس از قیاق و نیشكر در ایران :

تاكنون چندین پوتی ویروس از گیاهان تیره غلات در نقاط مختلف ایران گزارش شده اند. مطالعات مقدماتی نشان داده است كه این جدایه ها با گروه بندی هایی كه در سایر نقاط دنیا برای پوتی ویروس های غلات ارایه شده است همخوانی كامل ندارند. مطالعه حاضر به منظور تفكیك و گروه بندی پوتی ویروس های غلات در ایران با استفاده از آزمون های سرولوژیكی انجام شده است. در این تحقیق جدایه های مولد موزاییك قیاق در شیراز (JG-Shi)، كرج (JG-Krj)، اصفهان (JG-Sar)، آمل (JG-Aml)، رامسر (JG-Ram)، آستانه (JG-Ast)، صفادشت (JG-Saf) و ماهان (JG-Map) و نیشكر خوزستان (SC-Q86, SC-L66) و ساری (SC-Sar) مورد مطالعه قرار گرفتند. این جدایه ها با استفاده از مایه زنی مكانیكی به سورگوم منتقل و پس از خالص سازی بیولوژیك تكثیر شدند. این جدایه ها به روش “minipurrification” تغییر یافته و به ترتیب زیر خالص سازی شدند. چهل گرم بافت آلوده با استفاده از 7.5 حجم بافرسیترات آمونیوم 0.1 مولار (pH=6.5) حاوی 2-ME %0.25, PVP%1 و NaDIECA %0.01 همگن سازی شد. افشره حاصله با افزودن 8% تریتون X-100 زلال سازی شد. پیكره های ویروسی با استفاده از سانتریفوژ كردن در سرعت بالا بر روی بالشكی از سوكروز 30% رسوب داده شدند. آموده های ویروسی با استفاده از ستون شیب چگالی سزیوم سولفات 10-50% خالص تر شدند. لایه ویروسی به دست آمده از ستون شیب چگالی جهت تهیه پادتن های چند همسانه ای به خرگوش تزریق شد. پادتن های بدست آمده در آزمون های نشت دو طرفه در آگار و ELISA به منظور تعیین ارتباط سرولوژیكی این جدایه ها مورد استفاده قرار گرفتند.پوتی ویروس های مولد موزاییك قیاق در شیراز، كرج، اصفهان و ساری و نیز جدایه های نیشكر SC-Q86 و SC-L66 به طور موفقیت آمیز با استفاده از روش “minipurrification” تغییر یافته خالص سازی شدند. عملكرد خالص سازی 50-10 میلی گرم ویروس در هر 100 گرم بافت آلوده بود. SDS-PAGE در ژل آكریل آمید 12% نشان دهنده یك باند قوی در موفقیت 41-35 كیلو دالتون در جدایه های مختلف بود. وسترن بلات با استفاده از پادتن اختصاصی پروتئین پوششی نشان داد كه این باند پروتئین پوششی ویروس می باشد.آزمون های سرولوژیكی نشان داد كه پوتی ویروس های مولد موزاییك غلات در ایران حداقل به سه گروه تقسیم می شوند: (1) ویروس موزاییك ایرانی قیاق (IJMV)، شامل جدایه های JG-Ram, JG-Aml, JG-Sar, JG-Krj, JG-Shi و JG-Ast. این گروه از نظر سرولوژیكی با MDMV, SrMV, SCMV و JGMV متفاوت است؛ (2) ویروس موزاییك نیشكر (SCMV) شامل جدایه SC-Q86؛ (3) ویروس موزاییك كوتولگی ذرت(MDMV)، شامل جدایه های SC-Sar, SC-L66 و SC-Isf. جدایه JG-Saf از نظر سرولوژیكی به IJMV و MDMV مرتبط بود در حالی كه جدایه SC-Sar با SCMV و MDMV ارتباط داشت. آزمون های سرولوژیكی نتوانستند مشخص كنند كه آیا این جدایه ها ویروس های جدیدی هستند و یا اینكه نوعی آلودگی مخلوط به دو ویروس مجزا در این گیاهان وجود داشته است.
كلید واژه: پوتی ویروس های غلات، ویروس موزاییك نیشكر، ویروس موزاییك ایرانی قیاق، ویروس موزاییك كوتولگی ذرت، سرولوژی، خالص سازی، قیاق، ذرت، نیشكر

برای دریافت اینجا کلیک کنید